Um weiter zu bestimmen, ob eine EGFR-Kinase-Aktivität Puma 2019 für die EGFR-PUMA-Wechselwirkung erforderlich ist, behandelten wir U87MG-EGFR-Zellen mit einem niedermolekularen EGFR-Kinase-Inhibitor, Iressa, der klinisch zur Hemmung der EGFR-Aktivität eingesetzt wird. Wie in Fig. 6b (linkes Feld) gezeigt, änderte Iressa die EGFR-Bindung an PUMA nicht, reduzierte jedoch erwartungsgemäß das Niveau der EGFR-Auto-Phosphorylierung / -Aktivierung signifikant.
Die EGFR-PUMA-Wechselwirkung ist unabhängig von der ligandenvermittelten Rezeptoraktivierung und wird unter EGFR-Hemmung aufrechterhalten. (A) Die EGFR-PUMA-Wechselwirkung tritt unabhängig von der ligandenvermittelten Rezeptoraktivierung auf. U87MG-EGFR-Zellen wurden 24 Stunden lang an Serum gehungert und 20 Minuten lang mit EGF stimuliert. Die Zellen wurden geerntet und einer Immunpräzipitation / Western Blot (linkes Feld) und Western Blot (rechtes Feld) unterzogen. Ein EGFR-Antikörper wurde zur Immunfällung von EGFR verwendet. Puma Basket Platform Kontroll-IgG ergab keine Signale, die auf Spezifität hinweisen.
Unsere Ergebnisse zeigen jedoch auch, dass PUMA durch EGFR / EGFRvIII-unabhängige Mechanismen negativ reguliert werden kann, da ein Teil der PUMA-exprimierenden GBMs kein EGFR / EGFRvIII exprimiert (2a). Zukünftige Untersuchungen sind Puma Bmw daher erforderlich, um diese Mechanismen zu identifizieren und die apoptotischen Wirkungen der Anti-GBM-Therapie zu verstärken. Die funktionelle Wechselwirkung zwischen EGFR / EGFRvIII und PUMA stellt möglicherweise eine neue Klasse von Protein-Protein-Wechselwirkungen dar, an denen eine Rezeptortyrosinkinase und ein Proapoptotikum beteiligt sind Protein.
Unsere Ergebnisse zeigten, dass Iressa, ein auf EGFR gerichteter Tyrosinkinaseinhibitor, die Wechselwirkung zwischen EGFR / EGFRvIII und PUMA nicht unterbricht, was darauf hindeutet, dass diese kinaseunabhängige antiapoptotische Aktivität ein wichtiger Mechanismus sein könnte, der der begrenzten Puma Creepers klinischen Wirksamkeit von EGFR zugrunde liegt. Gezielte Therapie. Diese Beobachtungen legen auch nahe, dass eine höhere therapeutische Wirksamkeit erzielt werden kann, indem sowohl kinaseabhängige als auch -unabhängige Funktionen von EGFR angestrebt werden. Zur Untermauerung dieser Prämisse zeigten unsere Daten, dass die Nachahmung der proapoptotischen Aktivität von PUMA unter Verwendung eines Bcl-2 / Bcl-xL-Inhibitors sowohl EGFR- als auch EGFRvIII-exprimierende GBM-Zellen gegen Iressa sensibilisierte und dass die meisten von uns analysierten GBM-Zelllinien hohe Konzentrationen an Bcl exprimierten. 2 und Bcl-xL.
Geringe Vermeidungsraten zwischen Individuen und eine hohe Anzahl von Individuen trugen langfristig (3 Monate bis 2 Jahre) zu einer geringen Konsistenz im Eigenheimbesitz bei. Jaguare und Pumas hatten ähnliche nächtliche Aktivitätspläne. Beide Arten nutzten ähnliche Lebensräume im Hahnenkammbecken, was durch eine hohe Korrelation der Fangraten pro Standort zwischen den Arten angezeigt wird. Puma Damen Abgesehen von ihrer allgemeinen räumlichen Ähnlichkeit vermieden es Jaguare und Pumas, denselben Ort zur selben Zeit zu benutzen. Diese interspezifische Trennung war über die räumliche und zeitliche Trennung einzelner Jaguare hinaus nachweisbar.
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